木聚糖酶（檢測(cè)服務(wù)）

服務(wù)介紹：

木聚糖酶能將木聚糖降解成還原性寡糖和單糖，在沸水浴條件下可以與３,５-二硝基水楊酸(DNS)試劑發(fā)生顯色反應(yīng)。反應(yīng)液顏色的深度與酶解產(chǎn)生的還原糖量成正比，而還原糖的生成量又與反應(yīng)液中木聚糖酶的活力成正比。因此，通過測(cè)定反應(yīng)液顏色的強(qiáng)度，可以計(jì)算反應(yīng)液中木聚糖酶的活力。

背景介紹：

木聚糖酶（Xylanase）又稱戊聚糖酶，是指能專一降解木聚糖為低聚木糖和木糖的水解酶。它是一組復(fù)雜的復(fù)合酶系，主要包括β-1,4-木聚糖酶和β-木糖苷酶等。木聚糖酶的活性來(lái)源于經(jīng)選擇的木霉菌等微生物，經(jīng)過基因工程的轉(zhuǎn)化、發(fā)酵、提取而得。

木聚糖酶在自然界分布廣泛，可從動(dòng)物、植物和微生物中獲得。微生物來(lái)源的木聚糖酶普遍存在于自然界中，且種類繁多，應(yīng)用領(lǐng)域廣泛。目前研究和應(yīng)用得最多的是細(xì)菌和真菌來(lái)源的木聚糖酶，其中細(xì)菌可以產(chǎn)生堿性和酸性木聚糖酶。

應(yīng)用：

1、改善消化系統(tǒng)功能：木聚糖酶可以分解食物中的木聚糖，使食物更容易被人體消化和吸收，還可以促進(jìn)腸道蠕動(dòng)，有助于改善便秘、消化不良等癥狀。

2、促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收：木聚糖酶可以分解食物中的蛋白質(zhì)、脂肪等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，使其更容易被人體吸收利用，有助于增強(qiáng)體質(zhì)，提高免疫力。

3、工業(yè)應(yīng)用：木聚糖酶在釀造、飼料工業(yè)中也有廣泛應(yīng)用。它可以分解釀造或飼料工業(yè)中的原料細(xì)胞壁以及β-葡聚糖，降低釀造中物料的粘度，促進(jìn)有效物質(zhì)的釋放，以及降低飼料用糧中的非淀粉多糖，促進(jìn)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的吸收利用。

操作步驟（僅供參考）：

1、準(zhǔn)備樣品:

①固體樣品稱取試樣兩份，精確至0.001 g。 加入4ml Assay buffer，充分溶解，并定容至10 ml，在4 °C條件下避光保存1~2h。1000g離心3~5min，取上清液，再用Assay buffer做適當(dāng)稀釋、定容(稀釋后的酶液中木聚糖酶活力最好能控制在0.04~0.10U/ml之間）。

②液體樣品可以直接用Assay buffer稀釋、定容(稀釋后的酶液中木聚糖酶活力最好能控制在 0.04~0.10 U/ml之間）

2、配制木聚糖溶液：準(zhǔn)確稱取0.15g 木聚糖，使充分溶解于8ml去離子和5ml NH水溶液(3×)中，通過pH計(jì)測(cè)定，用YS溶液調(diào)節(jié)pH至5.5~5.6，補(bǔ)水至15ml

2、配制NH水溶液(1×)：取1份NH水溶液(3×)和2份去離子水混合即成。

3、標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制：取8支離心管按下表設(shè)置，準(zhǔn)確吸取木糖標(biāo)準(zhǔn)(10mg/ml)與Assay buffer，即得不同濃度的木糖梯度標(biāo)準(zhǔn)。

取1支離心管，加入0.08mlAssay buffer和0.1mlDNS試劑，混勻，沸水浴加熱5min，自來(lái)水冷卻至室溫，加NH水溶液(1×)0.32ml，即為空白管。另取7支離心管，加入0.04ml 37℃預(yù)熱的Assay buffer、0.04ml木糖梯度標(biāo)準(zhǔn)和0.1mlDNS試劑，混勻，沸水浴加熱5min，自來(lái)水冷卻至室溫，加NH水溶液(1×)0.32ml，即為標(biāo)準(zhǔn)管。以空白管調(diào)零，酶標(biāo)儀測(cè)定540nm處各管的吸光度。

測(cè)定樣品

①取適量的木聚糖溶液和酶提取液置于不同的離心管中，37°C 平衡 20 min；木聚糖溶液使用之前應(yīng)充分搖勻。

②取2支離心管按下表設(shè)置依次加入相應(yīng)試劑：

 以空白管調(diào)零，酶標(biāo)儀測(cè)定540nm處對(duì)照管和測(cè)定管的吸光度(分別記為A1、A0)。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

全自動(dòng)生化儀檢測(cè)后導(dǎo)出結(jié)果，結(jié)果由EXCEL形式發(fā)送。

送樣須知：

1.南京和上海地區(qū)的客戶可提供上門取樣服務(wù)，提前一天聯(lián)系

2.外地客戶可郵寄樣本，樣本運(yùn)輸應(yīng)符合一般的生物學(xué)要求，密封加冰袋或者干冰運(yùn)輸

3.若細(xì)胞、血清、組織樣本具有潛在的傳染性或致病性，請(qǐng)務(wù)必提前告知

4.測(cè)試結(jié)束提供實(shí)驗(yàn)報(bào)告后，樣本可以保留1個(gè)月，若需保留樣本或者回收樣本請(qǐng)?zhí)崆案嬷?/span>

備注：本公司對(duì)客戶的項(xiàng)目的專有技術(shù)和資料（包括實(shí)驗(yàn)方案，測(cè)試結(jié)果，樣本等）負(fù)有絕對(duì)保密的責(zé)任。

僅供科研實(shí)驗(yàn)用，不做其他用途！

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