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兔超氧化物歧化酶(SOD)elisa試劑盒真好用!

更新時(shí)間:2017-08-25      瀏覽次數(shù):1125

兔超氧化物歧化酶(SOD)elisa試劑盒簡(jiǎn)介

超氧化物歧化酶(英語(yǔ):Superoxide dismutase,別名肝蛋白、奧谷蛋白,簡(jiǎn)稱(chēng)SOD)是一種能夠催化超氧化物通過(guò)歧化反應(yīng)轉(zhuǎn)化為氧氣和過(guò)氧化氫的酶。它廣泛存在于各類(lèi)動(dòng)物、植物、微生物中,是一種重要的抗氧化劑,保護(hù)暴露于氧氣中的細(xì)胞。對(duì)人體不斷地補(bǔ)充SOD具有抗衰老的特殊效果。超氧化物歧化酶是1938Marn等人從牛紅血球中分離得到超氧化物歧化酶開(kāi)始算起,人們對(duì)SOD的研究己有七十多年的歷史。1969McCord等重新發(fā)現(xiàn)這種蛋白,并且發(fā)現(xiàn)了它們的生物活性,弄清了它催化過(guò)氧陰離子發(fā)生歧化反應(yīng)的性質(zhì),所以正式將其命名為超氧化物歧化酶。

兔超氧化物歧化酶(SOD)elisa試劑盒標(biāo)本保存

標(biāo)本的采集和保存

  ELISA試驗(yàn)所用標(biāo)本主要為血清,也可以用經(jīng)過(guò)預(yù)處理的唾液、尿液、糞便等生物材料。患者標(biāo)本可能含有干擾試驗(yàn)的免疫物質(zhì),導(dǎo)致假陽(yáng)性或者假陰性的結(jié)果,干擾因素一般可分為兩類(lèi),即內(nèi)源性和外源性干擾因素。內(nèi)源性干擾因素包括類(lèi)風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、高濃度的非特異性免疫球蛋白等,避免內(nèi)源性干擾因素主要通過(guò)選擇合理的試劑。外源性干擾因素包括標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、儲(chǔ)存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)及標(biāo)本凝固等。在血液采集和運(yùn)輸過(guò)程時(shí),應(yīng)注意避免溶血。否則,紅細(xì)胞溶解時(shí)會(huì)釋放出血紅蛋白,血紅蛋白中的亞鐵血紅素具有過(guò)氧化物酶活性的物質(zhì),在以HRP為標(biāo)記的ELISA試驗(yàn)測(cè)定中,可能會(huì)增加非特異性顯色而出現(xiàn)假陽(yáng)性結(jié)果。血清標(biāo)本適宜在新鮮時(shí)檢測(cè),若推遲檢測(cè)需將標(biāo)本低溫保存。一般說(shuō)來(lái),在7天內(nèi)檢測(cè)的血清標(biāo)本,可放置于2~8℃保存,超過(guò)1周檢測(cè)的需低溫冰存。因反復(fù)冰融會(huì)使抗體效價(jià)降低,所以,對(duì)需要保存做多次抗體測(cè)定的血清標(biāo)本,應(yīng)少量分裝并冰存。血清標(biāo)本應(yīng)充分離心,否則可因殘留的纖維蛋白原非特異吸附于微孔而造成假陽(yáng)性結(jié)果。

加樣操作中,依次有3次加樣,即加標(biāo)本、加酶結(jié)合物、加底物。加標(biāo)本一般采用手工加樣或者加樣器。手工加樣每次必須更換吸嘴,以避免交叉感染。要掌握好并在實(shí)際操作中揣摩使用技巧,避免吸樣量過(guò)多或過(guò)少。加樣器在長(zhǎng)時(shí)間使用時(shí)會(huì)因機(jī)械磨損或推動(dòng)桿內(nèi)附著的血痂等原因造成加樣不準(zhǔn),因此必須定期對(duì)加樣器進(jìn)行維護(hù)和校準(zhǔn)。加酶結(jié)合物和底物一般可直接滴加。每次加樣時(shí),應(yīng)將所加物置于ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,注意不可濺出,不能產(chǎn)生氣泡,加酶試劑后要用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板上輕輕擦拭吸干。加底物操作時(shí)應(yīng)注意各試劑盒顯色劑不能混用,添加順序不能顛倒,不能濺出孔外。標(biāo)本較多時(shí),需要分批操作,以免加樣板過(guò)多,造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過(guò)長(zhǎng)(尤其是在室溫較高時(shí))。zui后,在微型振蕩器上震蕩lmin,以保證混勻。

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