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microRNA（miRNA）是天然存在、長約22個核苷酸的非編碼RNA，它們介導了轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)控。miRNA在許多生物過程中扮演了重要角色，包括分化和發(fā)育、細胞信號通路以及對感染的反應。大量的證據(jù)表明，miRNA表達的失調(diào)是一些疾病過程（包括許多癌癥）的起因或指示劑。研究還發(fā)現(xiàn)血清和血漿中可以檢測到循環(huán)miRNA，且它們的表達因疾病而異，這一發(fā)現(xiàn)說明循環(huán)miRNA的表達特征可作為疾病診斷和預防的生物標志物，具有巨大潛力。

miRNA研究的成功依賴于高性能工具和技術的使用。QIAGEN是一個一站式供應商，滿足您在miRNA純化、定量和功能鑒定上的所有需求。歡迎訪問QIAGEN的GeneGlobe® 網(wǎng)頁），訂購miRNA特異的產(chǎn)品，并發(fā)現(xiàn)大量寶貴的基因信息、通路信息和生物信息學工具。

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QIAGEN提供了以下方案：

一、miRNA純化
利用miRNeasy Kits和PAXgene® Kits純化高質(zhì)量總RNA，包括miRNA。

二、miRNA表達譜分析
利用miScript® miRNA PCR Arrays快速分析整個miRNA組（miRNome）或通路聚焦的miRNA分析板

三、miRNA生物發(fā)生和調(diào)控研究
利用miScript PCR System同時定量成熟的miRNA（聯(lián)合miScript Primer Assays）、前體miRNA（聯(lián)合miScript Precursor Assays）和mRNA目標（聯(lián)合QuantiTect® Primer Assays）。

四、miRNA功能分析
利用miScript miRNA Mimics、Inhibitors和Target Protectors確定miRNA的功能。

miRNA的純化

高質(zhì)量miRNA純化

高質(zhì)量的總RNA（包括miRNA）的純化，是成功的miRNA定量實驗的前提條件，因為質(zhì)量不佳的RNA會阻礙酶促反應，且小RNA的低效純化會導致不準確的結(jié)果。為miRNA純化而推出的miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 確保您的實驗有zui高質(zhì)量的RNA。miRNA產(chǎn)量優(yōu)于其他miRNA純化方法，如苯酚抽提和沉淀。如有必要，miRNA純化也可在QIAcube®或QIAsymphony® 儀器上自動開展

總RNA的純化或miRNA的富集

miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 可純化總RNA，包括~18 nt以上的RNA。另外，對于所有樣品類型，除包含嚴重降解RNA的樣品（如FFPE組織）和包含少量大RNA（如血清/血漿樣品）的樣品外，miRNeasy Kits可分別純化富含miRNA的組分（< ~200 nt）和總RNA組分（> ~200 nt）。利用miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 純化得到的RNA適合各種下游應用，如northern blot分析、芯片分析及實時定量RT-PCR。在某些應用（如一些芯片系統(tǒng)）中，小RNA的富集可降低背景，但利用miScript miRNA PCR Arrays 和miScript Primer Assays 的分析則不需要。

從組織和細胞中純化

miRNeasy Mini、Micro和96 Kits 可從組織和細胞中純化RNA，即使所用的起始材料量很少。RNA可從各種組織和細胞中純化，包括難以裂解的組織。包括miRNA在內(nèi)的總RNA純化實現(xiàn)了miRNA與那些目標mRNA、參照看家基因或其它目的mRNA表達水平的直接比較。

從血清或血漿中純化循環(huán)miRNA

循環(huán)miRNA可作為檢測不同癌癥及其他疾?。ㄈ缣悄虿。┑臐撛谏飿酥疚铩＠脧难寤蜓獫{中純化得到的RNA，研究已發(fā)現(xiàn)一些miRNA在一些癌癥中的*表達。miRNeasy Serum/ Plasma Kit 能夠從少量的血漿或血清中純化總RNA。miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control提供了一個合成的加標對照，適用于研究血清或血漿樣品時的標準化。純化得到的RNA之后可用于miScript PCR System，以發(fā)現(xiàn)生物標志物。

從FFPE切片中獲得高純度RNA

交聯(lián)和片段化讓FFPE切片的核酸純化挑戰(zhàn)性。miRNeasy FFPE Kit 提供了特殊的裂解和孵育條件，對RNA解交聯(lián)，并有效純化RNA，同時避免RNA的進一步降解。為了去除痕量的小DNA片段，以免妨礙下游分析（如實時定量RT-PCR），RNA經(jīng)過DNase 和DNase Booster Buffer 處理，此緩沖液優(yōu)化了DNase反應。利用miRNeasy FFPE Kit 制備的總RNA隨后可用于miScript PCR System，以釋放寶貴的表達數(shù)據(jù)。

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