胎牛血清采血方法及保存
1、挑選出大約8月齡以上的健康妊娠母牛,經(jīng)剖腹獲取小牛。
2、將小牛清洗干凈后,側(cè)放在萬(wàn)級(jí)潔凈房間內(nèi)的采血臺(tái)上,固定四肢及頭部。
3、用來(lái)蘇水清洗心臟外部,刮去心臟外部牛毛,露出心臟外部一側(cè)皮膚,用2%碘酒擦拭消毒。
4、在心臟部位切開(kāi)一道10厘米左右的切口,取出近心血管,先用2%碘酒消毒,再用75%的酒精消毒,用止血鉗夾住血管,切開(kāi)1厘米左右的切口進(jìn)行插管,插好管后打開(kāi)血管的止血鉗,讓牛血順采血管流入另一個(gè)潔凈房間內(nèi)的采血瓶中。
5、采血瓶采血前經(jīng)干烤滅菌(180℃2小時(shí))后,按無(wú)菌操作注入10毫升左右經(jīng)高壓滅菌的生理鹽水后加塞封口,于采血前半小時(shí)放入37℃恒溫箱備用。采血前先晃動(dòng)瓶?jī)?nèi)生理鹽水,使其充分濕潤(rùn)瓶壁后倒出,再進(jìn)行采血并加塞封口。將采血后的采血瓶放37℃恒溫室2小時(shí),再放入4℃冷庫(kù)4小時(shí)以備離心。
采集后的胎牛血清需要冷凍保存，那么在下一次使用的時(shí)候，如何解凍呢？下面就來(lái)說(shuō)說(shuō)胎牛血清解凍過(guò)程。
(1)解凍血清時(shí),請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,減少沉淀的發(fā)生。
(2)血清分裝凍存時(shí),須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一。
(3)勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4)勿將血清置于37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì)。
(5)血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,可以無(wú)須做此步驟。
(6)若必須做血清的熱滅活,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,并且隨時(shí)搖晃均勻。溫度過(guò)高,時(shí)間過(guò)久或搖晃不均勻,都會(huì)造成沉淀物的增多。
更新時(shí)間：2018-12-06 
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