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信帆生物為您解答:RT-PCR 與WB結果的變化趨勢相反

更新時間:2016-07-06      瀏覽次數:6249

信帆生物為您解答:RT-PCR 與WB結果的變化趨勢相反!

RT-PCR 與WB結果的變化趨勢并不總是一致的,可以從以下幾個方面來解釋:
1、基因的表達分為轉錄和翻譯兩個層面,即mRNA水平和蛋白水平。而真核基因表達的轉錄和翻譯發(fā)生的時間和位點存在時空間隔;
2、在轉錄后,又會有轉錄后加工,轉錄產物的降解,翻譯,翻譯后加工及修飾好幾個層面。所以轉錄水平和翻譯水平并不*一致,且這種調節(jié)在不同蛋白質之間存在差異;
3、mRNA與蛋白質的半衰期不同,mRNA極易降解,在組織內存在時間較短,而翻譯成蛋白質后性質較穩(wěn)定;
4、正常狀態(tài)下,細胞內可能存在一定量的蛋白質儲備,不行使功能,而這種儲備量的多少在不同組織有所不同;
5、與檢測方法有關,RT-PCR檢測mRNA的靈敏度非常高,理論上只要有一個拷貝的目的基因即可檢測;
6、蛋白質是行使功能的基本單位,所以歸根結底要落實到蛋白水平究竟怎么變化,從而判斷其對相應功能的影響。

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