細(xì)胞線粒體分離試劑盒的相關(guān)介紹
  英文名：Cell Mitochondria Isolation Kit
  規(guī)格：50-100次
  細(xì)胞線粒體分離試劑盒是用于快速便捷分離培養(yǎng)細(xì)胞線粒體的試劑盒。
  本試劑盒在分離線粒體的同時(shí)可以獲得去除線粒體的細(xì)胞漿蛋白，可用于研究細(xì)胞色素c等線粒體蛋白向胞漿的釋放。
  使用本試劑盒分離獲得的線粒體純度較高，并且絕大部分分離獲得的線粒體都含有完整的內(nèi)膜和外膜，并具有線粒體的生理功能。因此本試劑盒分離得到的線粒體可以用于線粒體的生理功能等方面的研究。例如可以使用我公司的C2006 線粒體膜電位檢測(cè)試劑盒(JC-1)測(cè)定分離得到的線粒體的膜電位。
本試劑盒分離得到的線粒體也可以被試劑盒中的線粒體裂解液或其它適當(dāng)裂解液裂解后用于SDS-PAGE、Western、雙向電泳等蛋白分析。
本試劑盒提供了線粒體制備過程中勻漿程度的重要判斷指標(biāo)，即臺(tái)盼藍(lán)染色，使分離得到的線粒體的質(zhì)量更加有保證。臺(tái)盼藍(lán)染色液為選用試劑，在實(shí)驗(yàn)條件成熟后可以不必使用。
本試劑盒提供了蛋白酶抑制劑PMSF，使勻漿時(shí)蛋白酶的活性被適當(dāng)抑制，這樣在獲得線粒體的同時(shí)還可以獲得有時(shí)有用的去除了大量線粒體的蛋白，在進(jìn)行蛋白或酶活分析時(shí)可以作為對(duì)照。
如果每個(gè)樣品的細(xì)胞數(shù)量為2000-5000萬(wàn)，本試劑盒可以處理50-100個(gè)樣品。
保存條件：-20℃保存，一年有效。其中臺(tái)盼藍(lán)染色液也可以4℃保存，PMSF(晶體)和PMSF(溶劑)在配制成100mMPMSF溶液前可以室溫保存。
  注意事項(xiàng)：
 1、試劑盒中的試劑對(duì)于不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟槐厝渴褂谩?br /> 2、如果不是用于制備線粒體蛋白樣品，線粒體分離試劑和線粒體裂解液中不必加入PMSF。
 3、如果用于制備線粒體蛋白樣品，線粒體分離試劑和線粒體裂解液中需添加PMSF。PMSF一定要在線粒體分離試劑或線粒體裂解液加入到樣品中前2-3分鐘內(nèi)加入，以免PMSF在水溶液中很快失效。
 4、分離線粒體的所有步驟均需在冰上或4℃進(jìn)行，所用溶液需冰浴或4℃預(yù)冷。
 5、通常在分離線粒體時(shí)前后兩次離心速度選取600g和11,000g，如果希望純度更高，但對(duì)線粒體的得率要求不高，前后兩次離心速度可以采用1000g和3500g。
 6、臺(tái)盼藍(lán)與PMSF對(duì)人體有毒，請(qǐng)注意小心防護(hù)。